處理和保存

　　　　
　　處理和保存昆蟲外生殖器備作研究的方法很多，經(jīng)常使用而比較好的有：

　　1）．制片保存　昆蟲的外生殖器，一般說來角質化都比較強。因此，提取出來的材料，最好要經(jīng)過脫水、透明手續(xù)后用加拿大樹膠封在玻片中保存。因作好的生殖器玻片已與原來的標本分開，為防止混亂和丟失，玻片上一定要貼好與原標本完全相同的標簽，寫明種類、采集地點、日期及標本上的原來編號，然后放在玻片標本盒中保存。制片方法如下：

　　（1）加拿大樹膠制片法
　　將解剖出的昆蟲外生殖器放在10%的氫氧化鉀（KOH）溶液中，水浴加熱數(shù)分鐘（時間看蟲體的骨化程度而定），把不必要的肌肉、脂肪清除掉，用水洗凈，經(jīng)品紅染色，放入75%的酒精中保存?zhèn)溆?。制片時用各種濃度的酒精（85%，90%，95%），進行脫水處理。每更換一次濃度必須經(jīng)過相當長的時間（一般約15分鐘）。骨化較強的材料，要在每個濃度中延長時間。然后再放人100%的酒精（無水酒精） 中，浸泡約半小時或更長些。每次更換濃度時，要用濾紙或脫脂棉把原來酒精吸收干凈。以上這一步驟稱為脫水。進行封片的標本所以要進行脫水這一過程，是因為樹膠和水不能溶解在一起，如將帶有水分的標本封在膠中，便會混濁不清或使標本變質，不易保存。
　　經(jīng)過脫水的標本再放人二甲苯中把酒精替出，并起到透明作用。標本移到二甲苯中時，若溶液發(fā)現(xiàn)混濁現(xiàn)象，表示水分尚未脫凈，應再退回到100%的酒精中去處理。在二甲苯溶液中的時間不宜過長，只要蟲體完全透明，便可移到載玻片上。將蟲體位置擺好，并把標本邊緣多余的二甲苯吸去。立即滴上加拿大樹膠，隨即蓋上蓋片。蓋片時必須小心，用鑷子或手夾住蓋片的一端，斜向著載玻片，使蓋片的一端先碰到樹膠，然后很快將手或鑷子松開，使蓋片自然地貼在膠液上。這樣可避免產(chǎn)生氣泡。如果仍有氣泡發(fā)生，可用針輕壓蓋片，或在載片下稍加熱。但最好等待幾小時或在50度恒溫箱中放置一段時間，較小氣泡就會自然消失。
　　如果樹膠量加得合適，蓋玻片放好后，樹膠剛好溢到蓋片的四周。如蓋片下面仍有樹膠未溢到之處，說明加膠不充足。應及時用撥針粘樹膠滴在蓋片下缺膠部位的邊緣，膠便自然滲入與蓋片下的膠液愈合。加膠時千萬不要將膠掉在蓋片上。蓋好蓋片后，在載片的一端寫上臨時標簽，放在平穩(wěn)清潔但要通風的地方，最好放在上面有玻璃蓋的、下面有通風紗窗孔的晾片盒中。也可將載片放在用硬紙板作的，每張載片之間有隔格的晾片盤中，平穩(wěn)地放在干凈的書柜中，使其自然干燥。經(jīng)過10-15日后，蓋片周圍外溢的膠液已開始干固，便可開始修整，先用小別刀刮去載片上多余的樹膠，或用小毛筆蘸少許二甲苯輕輕擦去樹膠（但不要觸動蓋片），并擦凈載片上的灰塵，貼上正式標簽，一張玻片才算作好了。在未加修整前如果看到蓋片下標本的四周有似白色霧狀體時，那是因脫水不凈造成的。此種玻片標本不能使用，如是稀有標本應及時將整個玻片故在二甲苯中，溶去膠液取出標本，重新脫水、透明制作。封片時所用膠液如果過稀時，干固時由于二甲苯的蒸發(fā)會使蓋片下產(chǎn)生空隙，稱為脫膠。此時可先在蓋片下的空隙中滴入少許二甲苯，使原來膠液的邊緣溶解后，再用撥針滴人膠液，使其自然流人即可。一旦技術熟練后，上述許多缺點便會自然克服。
　　加拿大樹膠，是在化學試劑商店買的成品。如是樹膠干粉，可先在干凈玻皿中磨細，加入適量二甲苯溶解，裝人細頸瓶中備用。

　　（2）甘油魚膠制片法
　　先把魚膠切成小塊，在蒸餾水中浸泡2小時。連同放魚膠的溶器放在沸水中隔水煮至魚膠塊完全溶解后，加入甘油與石碳酸，同時用玻棒加速攪拌，趁熱過濾，保存在有色瓶中。甘油魚膠的配方是：
　　　清潔的魚膠 4克
　　　蒸餾水 70毫升
　　　純甘油 80毫升
　　　石碳酸 2毫升
　　這種膠液冷卻后便會凝固，用時先把膠瓶放在熱水中溶解。制片時先把標本放在甘油及水各半的混合液中一段時間。并將載片擦干凈烤暖，把標本放在適當位置，然后整姿，加甘油魚膠在標本上，蓋上蓋玻片，貼好標簽便可。
　　用這種膠液制片，可省略脫水手續(xù)，作為一般觀察效果很好。但在高溫潮濕地區(qū)使用，長期保存，蓋片邊緣的膠有生霉現(xiàn)象，可用毛筆蘸少許石碳酸清除。 

　　2）．貼封保存　是用厚紙剪成長方形塊，在一端的中央打好圓形孔，先用透明玻璃膠紙貼好一面，將處理好的外生殖器標本沾粘在膠紙向內的一面上，再用另一張膠紙貼好，或先用兩塊膠紙把材料貼封在中間，再用兩塊打好圓洞的方形紙將其粘合在中間，然后在紙塊上注明種類、采集日期等，插在原來標本的標簽下方。貼封保存昆蟲外生殖器適合于體型較小的種類。這種方法的優(yōu)點是外生殖器不離開原來的標本，可隨時取下在鏡下觀察。缺點是保存時間長久，膠紙失去原有的粘韌性而發(fā)脆龜裂，將材料損壞。

　　也可在打好圓孔的厚紙片上，先貼上一塊蓋玻片，上面滴上膠液，放上經(jīng)過脫水透明后的昆蟲外生殖器，再用四分之一大小的蓋片封蓋好。這種方法則兼顧了制片與貼封兩種方法的優(yōu)點。 

　　3）．瓶裝保存　是將用甘油臨時封裝法觀察研究過的昆蟲外生殖器材料，用甘油浸泡裝在小玻璃管內，同原來標本插在一支昆蟲針上，日后隨用隨取。甘油浸泡又能增加標本的透明度便于觀察；缺點是日久甘油會透過瓶塞外溢而揮發(fā)掉，要注意檢查補充。也可用由聚乙烯制成的小瓶封存。因聚乙烯不受普通酸及溶劑的影響，且不易破碎。瓶塞可用白硅酮橡膠制成。瓶塞稍有坡度以便貼合塞入瓶中。在一角度用針刺穿瓶塞以防甘油流出。這種裝昆蟲外生殖器小瓶直徑為5.5毫米，帶塞長17毫米。